了解D-蟲熒光素鉀鹽的使用方法

D-蟲熒光素(D-Luciferin)是螢火蟲熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。反應原理：首先，在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應，接著它被氧化形成二氧雜環丁烷結構并發出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發光用于ATP監控以測定細胞活力以及細菌計數。它還用于報告基因檢測?？膳c小動物活體成像系統配套使用，用于標記LUC基因后的體內活體熒光檢測。

應用:

(1) 體外分析

(2) 活體成像分析

(3) 高靈敏度ATP分析

使用方法:

1. 活體成像分析方法

(1) 用DPBS(w/o Mg2+ 、Ca2+ )配置D-Luciferin工作液(15mg/mL，超聲助溶)* ，0.2 μm濾膜無菌過濾。

(2) 注射量：10μL/g的體重，如10g 重小鼠，注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。

(3) 腹腔注射10～15分鐘后，上機進行圖像分析。

2. 體外分析方法

(1) 用無菌水配置200× 的D-Luciferin儲備液(30mg/mL，超聲助溶)*，立即使用，或-20℃保存。

(2) 用預熱好的充分培養基1∶200稀釋D-Luciferin儲備液，配置工作液(150μg/mL)。

(3) 去除培養細胞的培養基。

(4) 進行圖像分析前，向細胞中添加1× 的D-Luciferin工作液，進行圖像分析**。

(5)：溶解D-Luciferin時要充分。

(6)：在圖像分析前，將細胞進行37℃的短時間培養可以增加信號強度。

相關產品：

D-蟲熒光素游離酸(D-Luciferin, free acid)、D-蟲熒光素鉀鹽(D-Luciferin, potassium salt)和D-蟲熒光素鈉鹽(D-Luciferin, sodium salt)，鉀鹽、鈉鹽的形式是通用的，因為它們都易溶于水。鉀鹽也是活體動物檢測使用的主要形式。它們的激發和發射波長分別為328nm和533nm。

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