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    ELISA標本收集

    更新時間:2012-06-04  |  點擊率:3355

     ELISA標本收集

    在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是
    否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行
    檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標
    本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下
    保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗
    質量,所以避免反復凍融。代測標本的客戶取材前須向我司銷售人
    員索要說明書,具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。
    ELISA標本一般包括血清、血漿、尿液、細胞培養上清、組織標
    本、胸腹水、腦脊液等。
    血清:
    室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉
    /分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    血漿:
    應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合
    10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上
    清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    尿液:
    用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集
    上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參
    照此實行。
    細胞培養上清:
    檢測分泌性的成份時, 用無菌管收集。離心2 0 分鐘左右
    (2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用
    PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。
    通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左
    右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形
    成,應再次離心。
    組織標本:
    切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速
    冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的
    PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左
    右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其
    余冷凍備用。
    腦脊液標本:
    腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變
    性,破壞,導致計數和分類不準;有些化學物質如葡萄糖等將分解
    含量減少;細菌發生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分
    裝三個無菌管,*管作細菌培養,第二管作化學分析和免疫學檢
    查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標
    本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全。
    胸腹水標本:
    與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,及時送檢。一般也分
    裝三管,一管作常規細胞學檢查,一管生化檢查,一管細菌培養,
    順序以與腦脊液相同為宜




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