植物elisa試劑盒操作注意事項

　　植物elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
 

　　植物elisa試劑盒操作注意事項：
 

　　1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
 

　　2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
 

　　3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
 

　　4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
 

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
 

　　6.底物請避光保存。
 

　　7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
 

　　8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
 

　　9.本試劑不同批號組分不得混用。
 

　　植物elisa試劑盒結果判定：
 

　　試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
 

　　臨界值(CUT OFF)計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
 

　　陰性判定：樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為甘薯病毒(SPV)陰性
 

　　陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為甘薯病毒(SPV)陽性